Wir erforschen den Boden/Wir weisen Bakterien mit dem Lichtmikroskop nach: Unterschied zwischen den Versionen

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==Wir weisen Bakterien mit dem Lichtmikroskop nach==
==Wir weisen Bakterien mit dem Lichtmikroskop nach==


 
 
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<h5 align="center">'''Informationen zum Thema'''</h5>
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<h5 align="center">'''Untersuchungsmaterialien'''</h5>
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|Mikroskop
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* Mikroskop


Objektträger
* Objektträger


Glasstab zum Verrühren des Substrats
* Glasstab zum Verrühren des Substrats


Bunsenbrenner
* Bunsenbrenner


Modernes Lichtmikroskop
* Modernes Lichtmikroskop
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[[Bild:Fluorescence_microscop.jpg|300px]]
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Karbolfuchsinlösung nach Ziel-Neelsen (Merck Art. 9 215)
* Karbolfuchsinlösung nach Ziel-Neelsen (Merck Art. 9 215)


Ölimmersionszubehör
* Ölimmersionszubehör


mehrere ausgewachsene Regenwürmer
* mehrere ausgewachsene Regenwürmer
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<h5 align="center">'''Versuchsablauf'''</h5>


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<h5 align="center">'''Versuchsvorbereitung'''</h5>


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<h5 align="center">'''Verständnisfragen und Anweisungen zum Experiment: "Wir weisen Bodenbakterien mit dem Lichtmikroskop nach" '''
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<span style="font-family:palatino,serif; font-size:12pt;color:#000099;font-style:italic;">'''Verständnisfragen und Anweisungen zum Experiment: "Wir weisen Bodenbakterien mit dem Lichtmikroskop nach" '''</span></div>
 


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| 3. Wozu muss das Präparat erst mit Karbolfuchsin angefärbt werden?
| 3. Warum muss das Präparat erst mit Karbolfuchsin angefärbt werden?


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<span style="font-family:palatino,serif; font-size:12pt;color:#000099;font-style:italic;">'''Bebrüten der Kulturen'''</span></div>


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<h5 align="center">'''Bebrüten der Kulturen '''</h5>
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| Temperaturen von 25 bis 30 °C sind für das Bakterienwachst optimal Für die Einhaltung der Temperatur eignen sich insbesondere spezielle Brutschränke. Die Bebrütungsdauer ist mit drei bis fünf Tagen anzusetzen (Strahlenpilze ca.&nbsp; 14 Tage).
| Temperaturen von 25 bis 30 °C sind für das Bakterienwachst optimal Für die Einhaltung der Temperatur eignen sich insbesondere spezielle Brutschränke. Die Bebrütungsdauer ist mit drei bis fünf Tagen anzusetzen (Strahlenpilze ca.&nbsp; 14 Tage).
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<h5 align="center">'''Herstellung der Verdünnungsreihe '''</h5>
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<span style="font-family:palatino,serif; font-size:12pt;color:#000099;font-style:italic;">'''Verfahren für eine hohe Verdünnung (Zehntelungsverfahren) '''
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<h5 align="center">'''Verfahren für eine hohe Verdünnung (Zehntelungsverfahren) '''
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| Von jeder Verdünnung erhält man neun gleiche Abmessungen, während die zehnte zur Herstellung der nächsten Verdünnungsstufe dient. Das Gesamtvolumen wird um 10 % grol3er als theoretisch erforderlich gewählt, damit das letzte Teilvolumen besser einpipettiert werden kann.
| Von jeder Verdünnung erhält man neun gleiche Abmessungen, während die zehnte zur Herstellung der nächsten Verdünnungsstufe dient. Das Gesamtvolumen wird um 10 % grol3er als theoretisch erforderlich gewählt, damit das letzte Teilvolumen besser einpipettiert werden kann.
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<span style="font-family:palatino,serif; font-size:12pt;color:#000099;font-style:italic;">'''Beispiel'''
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<h5 align="center">'''Beispiel'''
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Version vom 28. März 2009, 10:40 Uhr

Wir erforschen den Boden


Sinn und Zweck

Mineralische Zusammensetzung

Einfache Analyseverfahren

Organische Zusammensetzung

Bodenwasser, -luft, -wärme

Bodenreaktion

Close-up of mole.jpg

Untersuchungsmethoden


Wir weisen Bakterien mit dem Lichtmikroskop nach

Informationen zum Thema


Ein Phänomen ist allen Bakterien gemein: Sie sind einzeln nicht mit dem bloßen Auge erkennbar (Größe ca. 1/1 000 mm). Mit dem Mikroskop lässt sich diese Distanz überwinden; es ist der Einstieg in die vielfältige Welt der Mikroben. Unter dem Mikroskop soll Regenwurmkot untersucht werden, der eine hohe Bakterienkonzentration garantiert. Zwecks besserer Erkennbarkeit wird die bakterienhaltige Suspension mit Karbolfuchsin vorbehandelt.


Untersuchungsmaterialien


 
  • Mikroskop
  • Objektträger
  • Glasstab zum Verrühren des Substrats
  • Bunsenbrenner
  • Modernes Lichtmikroskop

Fluorescence microscop.jpg

  • Karbolfuchsinlösung nach Ziel-Neelsen (Merck Art. 9 215)
  • Ölimmersionszubehör
  • mehrere ausgewachsene Regenwürmer
Versuchsablauf


a) Streiche mit dem Zeigefinger den Darminhalt eines Regenwurms auf einen Objektträger.
b) Verdünne und verteile den Kotballen mit Wasser auf dem Objektträger.
c) Färbe die Proben mit Karbolfuchsinlösung.
d) Lass das Präparat trocknen und mikroskopiere dann.
e) Versuche Form und Färbung der Bakterien festzustellen.

 



Versuchsvorbereitung


1. Mikroskop bereitstellen
2. Regenwürmer ausgraben und in einem Topf mit Erde aufbewahren.
3. Für den nicht erfahrenen Lehrer empfiehlt sich ein Probeversuch.
4. Der eigenständige Umgang mit dem Mikroskop stellt für den unerfahrenen Schüler ein erhebliches Problem dar und muss entsprechend eingeübt werden.


Verständnisfragen und Anweisungen zum Experiment: "Wir weisen Bodenbakterien mit dem Lichtmikroskop nach"
1. Was hast du in diesem Experiment getan?
2. Wozu wird der Darminhalt eines Regenwurms als Probe für eine Bakterienuntersuchung genommen?
3. Warum muss das Präparat erst mit Karbolfuchsin angefärbt werden?


Bebrüten der Kulturen
Temperaturen von 25 bis 30 °C sind für das Bakterienwachst optimal Für die Einhaltung der Temperatur eignen sich insbesondere spezielle Brutschränke. Die Bebrütungsdauer ist mit drei bis fünf Tagen anzusetzen (Strahlenpilze ca.  14 Tage).


Herstellung der Verdünnungsreihe
In einem Gramm Boden leben zwischen einer Million und einer Milliarde Bakterien. Es ist unmöglich, auch nur den Bakteriengehalt von einem Gramm Boden unter dem Mikroskop auszuzählen. Pro Flächeneinheit muss die Anzahl der Bakterien stark herabgesetzt werden.
Verfahren für relativ geringe Keimzahlen
1 g Boden mit bekanntem Wassergehalt wird in ein 100 ml Gefäß gegeben. Das Gefäß wird mit 0,l%iger Natriumpyrophosphatßsung bis zur Eichmarke aufgefüllt. ßsung schütteln!
Von dieser Bodensuspension (Verdünnung 1 100) werden 10 ml mit einer sterilen Pipette entnommen und wieder in ein 1-Liter-Gefäß übergeführt und aufgefüllt (Verdünnung 1 : 10 000). ßsung schütteln!

Verdünnungsreihe.jpg

Keimzahlen.jpg


Verfahren für eine hohe Verdünnung (Zehntelungsverfahren)

Von jeder Verdünnung erhält man neun gleiche Abmessungen, während die zehnte zur Herstellung der nächsten Verdünnungsstufe dient. Das Gesamtvolumen wird um 10 % grol3er als theoretisch erforderlich gewählt, damit das letzte Teilvolumen besser einpipettiert werden kann.


Beispiel


1,1 g Boden werden mit 108,9 ml Natriumpyrophosphatßsung versetzt. Von
dieser Verdünnungsstufe (1: 100) werden wieder 9 Reagenzgläser mit je
10 ml Suspension abgefüllt. Weitere 11 ml dienen zur Herstellung der
nächsten Verdünnungsstufe.
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